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應用案例 || 微生物土壤呼吸實驗室測量方法及數據對比

發布時間:2025/9/17 15:50:06      

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土壤呼吸,是指土壤中的植物根系、食碎屑動物、真菌和細菌等進行新陳代謝活動,消耗有機物,產生二氧化碳的過程。其中包括土壤中微生物分解有機物的過程。在這個過程中,需氧微生物消耗氧氣,將有機物最終分解為二氧化碳和水。

——土壤微生物有氧呼吸是通過觀測O2的消耗和/或CO2的釋放來測量。

——土壤呼吸強度是評價土壤微生物總活性的重要指標,也可用于評價土壤肥力。


土壤呼吸體現了土壤承載包括作物、植物生長、土壤動物和微生物在內的土壤生命的能力。它是土壤健康的重要指標,體現了生物活性、土壤有機質和降解能力。尤其是在分解過程中,有機質所含的有機營養物質(如有機磷、氮和硫)轉化為可供植物吸收的無機形式。

在實驗室中,土壤呼吸被用來估算土壤微生物生物量。事實上,土壤呼吸表明土壤維持植物生長的能力。由于保護有機質的土壤團聚體遭到破壞,土壤通氣性增加,導致耕作后過度呼吸和有機質分解。在缺乏額外投入的情況下,有機質減少、土壤聚集減少、植物和微生物可利用的養分有限,會導致作物減產。在未知碳添加量的情況下,很難預測有機質積累和損失的閾值。

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得益于呼吸傳感器,我們可以直接測量土壤微生物呼吸

——測定土壤微生物活性;

——確定添加劑(營養物、污染物、土壤改良劑等)對微生物代謝能力的影響;

——確定微生物生物量。


樣品

生物土壤有機調節劑,ID EN99


所需試劑

氫氧化鉀(KOH),用于吸收二氧化碳。


分析儀器

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樣品制備

調整土壤中的水分含量

土壤樣品必須濕度適當,以使微生物得以活化。

•  如果土壤過干,微生物沒有活性,土壤微生物轉化過程停止。

•  如果土壤太濕,缺氧條件下發生厭氧呼吸,產生難聞的氣味和對植物有害的酸。


檢測土壤水分含量

一個簡單方法,用手抓一把土壤,用力握緊,然后松開手。

•  如果土壤過干,就會散開,如果正常,就會保持原來的形狀。

•  如果土壤過濕,當緊握時會有水分擠出。

根據情況,可以采取必要的措施,如加水或者覆蓋干土。

當土壤濕度調整合適后,需要測定土壤干質量分數。


測量土壤體積

在200或250ml量筒中,加入100ml水,再加入50-100g土壤,加入土壤后的總體積減去水的體積就是土壤的體積。


分析過程

1、分析過程適宜的溫度是20-25 ℃,我們將培養箱設置為25 ℃。

2、連接Wireless DataBox,并填寫RESPIROSoft軟件數據庫。

3、在燒杯中稱取50-200克混合均勻的土壤,并將其轉移到1升測試瓶中。

4、在堿容器內添加適量的KOH。

5、將呼吸傳感器安裝在測試瓶上,并擰緊。

6、將測試系統放入已經達到設定溫度的培養箱中。

7、等待至少3個小時,使測量系統達到設定溫度,并產生初始壓力升高的圖形。

8、按下開始鍵,持續運行測試至少15天。


測試結果

根據公式計算游離氣體積:

Vfg=Vtot-Vav-Vam-Vsm

Vfg:游離氣體積,單位升;

Vtot:測試容器的總體積,不包括土壤、吸附劑容器和吸附劑的總體積,單位升;

Vav:吸收容器的體積,單位升;

Vam:吸收劑體積,單位升;

Vsm:土壤體積,單位升。


干土質量計算

根據公式計算土壤干重:

msd=msm×Wsd

msd:土壤干重,單位千克;

msm:土壤濕重,單位千克;

Wsd:濕土樣品的干質量分數。


O2消耗率計算


根據公式計算O2消耗率:

RO2=32000·Vfg·ΔP/t·R·T·msd

RO2:單位質量干土壤的氧氣消耗速率,mgO2/g/h;

32000:氧氣的摩爾質量,mg/mol;

Vfg:游離氣體積,L;

R:氣體常數,83.14hPaL/mol/K;

T:測量溫度,K;

msd:土壤干重,g;

ΔP:測得的壓力差,hPa

t:測試時間,h


測試結果

VELP的RESPIROSoft軟件自動采集壓力傳感器的壓力值,并以生成圖形顯示,下圖是100g樣品在298K測試的曲線圖。

圖片.png


注意:當測試系統內壓力下降到800mbar時,瓶內氧氣消耗殆盡,需要打開測試瓶補充空氣,然后再繼續測試。

以下是對三個樣品測試的結果。分析時間20天,選擇這個時間是為了監測氧氣消耗隨時間的變化。

樣品A

稱樣量:200g

T=298K

Vfg=0.965L

t=72h

圖片.png

樣品B

稱樣量:200g

T=298K

Vfg=1.037L

t=72h

圖片.png

樣品C

稱樣量:200g

T=298K

Vfg=1.081L

t=72h

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結論

從RSD%值(<3.29%)可以看出,VELP的土壤呼吸傳感器系統是一種可靠的微生物土壤呼吸測定解決方案,這些分析具有出色的重復性。

得益于其創新的無線技術,傳感器根據設定的數據傳輸頻率,將壓力值實時傳輸到無線數據盒,然后,通過直觀的 RESPIROSoftTM界面顯示結果,便于數據管理和結果對比。也可以將呼吸測量傳感器連接到VELPErmes云平臺,便于遠程查看和監測實驗過程。




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